氯霉素检测试剂盒 型号：LN006
简介
氯霉素(Chloramphenicol)是一种广谱抗生素。由于其具有效果好以及价格低廉等优点，目前已被普遍应用于各类家禽、家畜、水产品及蜂制品的各种传染性疾病的治疗。然而氯霉素有其严重的副作用,它会抑制人体骨髓的造血功能，从而引起再生障碍性贫血和粒细胞缺乏症。目前，我国已禁止其使用。
我公司采用国内外先进的工艺与技术，研发出氯霉素ELISA检测试剂盒，简化了样品处理方式，使用简便，省时省力省钱，整个操作过程不到90分钟。本产品检测范围广(鸡肉、鱼、虾、蟹、牛奶、血清、肌肉、组织、饲料与蜂蜜等)，回收率为80%－120%，灵敏度可达到0.05ppb，是各类企业及各级政府检测机构的理想产品。
简单
1． 样品提取方便快捷。
2． 90分钟得到结果。
3． 只需基本的实验室设备。
4． 操作人员只需最基本的实验知识。
准确
1． 结果重现性高。
2． 精确至0.05ppb。
3． 与其它抗体的交叉反应率极低。
技术支持
我们为用户提供最方便、快捷、周到的服务。
产品规格
包装：每包96孔
灵敏度: 0.05ppb
测试区间：0.05ppb－4.05ppb
检测时间：80分钟(提取后)
储存条件：2-8℃
反应原理
本产品主要是利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的基本原理来进行的。在整个反应当中,样品中氯霉素含量越多，反应呈色就越淡。反之，样品中氯霉素含量越少，则呈色越深。
试剂盒组成
1、微量测试孔：每条8孔，每板12条
2、氯霉素标准溶液：
0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35 ppb、4.05 ppb，1.5ml/瓶
3、10倍浓缩萃取稀释液：一瓶，30ml/瓶
4、10倍浓缩洗涤液：一瓶，30 ml /瓶
5、氯霉素酶标记物： 一瓶，8 ml/瓶
6、底物溶液：一瓶，12 ml/瓶
7、反应终止液：一瓶，13 ml/瓶
使用说明
A、注意事项
1、使用前先将氯霉素标准溶液6瓶，浓缩萃取稀释液，浓缩洗涤液，酶标记物，底物溶液及微量测试孔条置于室温下，回温30分钟。
2、原倍萃取稀释液及洗涤液配制
用蒸馏水将10倍浓缩萃取稀释液及浓缩洗涤液分别以1： 9的比例稀释(即1mL浓缩液+9mL蒸馏水)，即可作为样品萃取稀释液与微孔板清洗液。
3、回温后，取出所需微量测试孔条，将剩余板条立即放回铝箔袋中用胶带封好，置于4oC保存。
B、样品制备
1.待测物为生乳，则依以下方法进行处理 (5倍稀释)
取100ul待测生乳加入400ul萃取稀释液，振荡混合后备用。
2.待测物为蜂蜜，则依以下方法进行处理
a.取2g蜂蜜、4ml蒸馏水与2ml 乙酸乙酯置入离心管中，震荡约5分钟，使其充分混合均匀。
b.离心10分钟(3000rpm)，取0.5ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50℃下氮气吹干(温度请勿超过50oC)。
c.加入0.5ml萃取稀释液，震荡约10秒钟后备用。
3. 待测物为血清、则依以下方法进行处理
a.抽取待检动物血液，离心或静置取其较透明之上层液(血清层)使用，注意不要有溶血。
b.将3ml血清加入离心管中，再加入6ml乙酸乙酯，震荡混合约30秒。
c.离心10分钟(3000rpm)，取2ml上层液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50oC下氮气吹干。
d.于此玻璃管中加入正己烷2ml，先将残余物完全溶解后，再加入1 ml萃取稀释液，震荡约30秒钟。
e. 离心10分钟(3000 rpm)，用吸管吸去上层液(正己烷) 及中间乳化层部分，弃掉。再吸取下层液(水层)备用。
f.若有乳化现象，请先将大部分上层液(正己烷)取出后，再将玻璃管置入80oC水中，隔水加热约5~10分钟，可改善乳化情形。
4. 待测物为鸡肉或鱼、虾，则依以下方法进行处理
a.将3克样品剪碎后放入50 ml离心管中，再加入6ml乙酸乙酯，并以均质机均质约1分钟，再震荡约30秒。
b.离心10分钟(3000rpm)，取2ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50oC下氮气吹干。
c.于此玻璃管中加入正己烷2 ml，先将残余物完全溶解后(若未能完全溶解，可能会导致回收率降低)，再加入1 ml萃取稀释液，震荡约30秒钟。
d.离心10分钟(3000 rpm)，用吸管吸去上层液(正己烷) 及中间乳化层部分，弃掉。再吸取下层液(水层)备用。
e.若有乳化现象，请先将大部分上层液(正己烷)取出后，再将玻璃管置入80oC水中，隔水加热约5~10分钟，可改善乳化情形。待测物为血清、则依以下方法进行处理
5.待测物为内脏(肝、心等)，则依以下方法进行处理(5倍稀释)
同上述步骤a~d，但下层液吸出后，再以萃取稀释液稀释5倍(即下层液50ul加萃取稀释液200ml)。
6.待测物为饲料，则依以下方法进行处理(10倍稀释)
同上述步骤a~d，但下层液吸出后，再以萃取稀释液稀释10倍(即下层液30ul加萃取稀释液270ml)。
C、操作步骤
本产品的酶标记物与氯霉素标准溶液均直接使用，无需再稀释。
1、于适当微孔中分别加入100mL标准溶液(0,0.05,0.15,0.45,1.35和4.05ppb)。
2、在另外的微孔中加入100mL 已完成前处理的样品溶液。
3、再于每一微孔中另再加入50mL酶标记物。
4、轻敲盘子四周，使其充分混合后于室温下避光静置温育1小时。
5、将微孔中的反应液甩掉，再将洗液加满每一微孔后甩掉，重复洗3次。
6、最后一次甩掉后，在吸水纸上拍干。
7、于每一微孔中加入底物溶液100mL后，轻敲盘子四周，使其充分混合。
8、于室温下避光静置温育20分钟。
9、于每一微孔中加入100mL反应终止液。
10、用酶标仪于波长450nm下判读。
D、判定
1. 计算B/B0值。用样品或标准液吸光度值(B)除以零标准吸光度值(B0)再乘以100%。
2. 以B/B0值为纵坐标，以标样浓度的对数值为横坐标，做标准半对数曲线。
3. 根据每个样品的B/B0值就可从曲线上读出相对应样品的浓度。
4. 由于样品经过了预先稀释，因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。
E、标准曲线 
F、灵敏度
氯霉素试剂检测盒的平均检测下限为 0.05ppb，此浓度之吸光值与阴性标准溶液(0ppb)之吸光值有明显的差异。
G、 特异性
针对以下抗生素进行交叉反应之测试，结果如下：
Chloramphenicol =100%
Chloramphenicol(free base) <0.1%
Gentamycin <0.1%
Tetracycline <0.1%
Penicillin G <0.1%
Sulfamethazine <0.1%
H、再现性
针对氯霉素检测试剂盒精密度测试，重复6次，所得不同浓度标准溶液的吸光值变异系数(%CV)如图2所示，显示氯霉素试剂盒有很高的再现性:
I、回收率
生乳(添加1.0ppb) 104~117%
蜂蜜(添加0.3ppb) 90~110%
虾及鱼肉(添加0.5ppb) 95~110%
鸡肉(添加0.5ppb) 90~120%
血清(添加0.5ppb) 100~120%
内脏(添加1.0ppb) 100~120%
饲料(添加2.0ppb) 80~110%
